液相色譜法測定生物發(fā)酵產(chǎn)品中腺苷的含量
本方法適用于蟲草、菌粉、靈芝等產(chǎn)品系列發(fā)酵產(chǎn)品
1 儀器與試劑
1.1儀器配置
等度系統(tǒng) | 具體配置 | 數(shù)量 | 備注 |
LC-500高壓輸液泵 | 1 |
| |
SPD-500紫外檢測器 | 1 |
| |
7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥 | 1 |
| |
色譜工作站 | 1 |
| |
C18色譜柱 250*4.6 5um | 1 |
| |
平頭進(jìn)樣針 | 1 |
| |
前處理設(shè)備 | 超聲波脫氣機(jī) | 1 |
|
溶劑過慮裝置 | 1 |
| |
真空泵 | 1 |
| |
溶劑過濾頭 |
| 有機(jī)/水系 |
1.2試劑
腺苷對照品含量≥99.0
色譜純甲醇,水為超純水其他為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件
色譜柱 C18(250 mm × 4.6 mm,5μm)
流動(dòng)相:甲醇:磷酸鹽緩沖液(pH 6.5) = 10:1
流速為1.0 ml /min
檢測波長為260nm
柱溫為室溫,進(jìn)樣量為20 μl
2.2 供試品溶液的制備
取擬青霉約1.0g,精密稱定,置于50 ml 量瓶,加入20% 甲醇定容至50 ml,密塞,稱定重量,超聲20min,放至室溫后稱重,用甲醇補(bǔ)足減失的重量。用0. 45 μm 微孔濾膜濾過后供分析。
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